Тест Кумбса

Що таке тест Кумбса?

Тест Кумбса використовується для виявлення антитіл проти еритроцитів (еритроцитів). Для визначення антитіл використовують так звану сироватку Кумбса, яку отримують із сироватки кроликів та сенсибілізують до людських антитіл.
Тест застосовується при гемолітичній анемії, несумісності резусу або незадовго до підозри на переливання крові. Гемолітична анемія - це форма анемії, а резус-несумісність описує несумісність групи крові.
Існує два різних типи тесту Кумбса, прямий і непрямий тест відрізняються за показниками та виконанням.

Причини тесту Кумбса

Прямий тест Кумбса застосовується при підозрі на гемолітичну анемію. Гемолітична анемія описує анемію, при якій клітини крові передчасно руйнуються через пошкодження.
При аутоімунних захворюваннях, таких як системний червоний вовчак, ревматоїдний артрит або хронічний лімфоцитарний лейкоз, утворюються антитіла, спрямовані проти власних клітин крові (так звані еритроцити). Зв'язування антитіл призводить до раннього розпаду клітин крові або до скупчення клітин крові в судинах. І те й інше призводять до падіння значення гемоглобіну.

Ще одне свідчення для прямого тесту Кумбса - це гемолітична хвороба новонароджених, тут антитіла проти резус-фактора утворюються в організмі резус-негативної матері. Якщо у ненародженої дитини резус-позитивні, антитіла від материнської можуть потрапляти в кровообіг плода і ініціювати там посилене розпад клітин крові. Новонароджені виділяються сильною анемією та жовтяницею.

Тест Кумбса регулярно застосовується в трансфузійній медицині. Він використовується для визначення груп крові перед переливанням крові (прикроватний тест), при якому невеликий зразок крові змішується з різними сироватками крові з груп крові A, B, AB та 0. Якщо кров залишається рідиною, кров пацієнта сумісна з відповідною групою крові. Переливання може бути проведено.

Непрямий тест Кумбса також може бути використаний для пошуку вільних антитіл в організмі пацієнта (тест пошуку антитіл), наприклад під час огляду материнства, під час підготовки до переливання онкологічних пацієнтів або людей, які вже отримали переливання крові.

Дізнайтеся все про тему тут: Непереносимість резус.

Препарат

Під час підготовки до тесту Кумбса спочатку готуються сироватки з антитілами, які підлягають випробуванню. Їх заповнюють у різні пробірки або наносять на тестові картки.

У повсякденній клінічній практиці, наприклад з тестом на ліжку вже є підготовлені тестові картки, які можна використати негайно. Далі кров відбирається у пацієнта і готується до тесту. Залежно від того, який тип проби Кумбса проводиться, потрібні клітини крові або сироватка (рідка частина крові) пацієнта.

Послідовність

Якщо проводиться прямий тест Кумбса, еритроцити фільтруються з крові пацієнта. Слід перевірити, чи є на них антитіла типу IgG, які викликають гемолітичну анемію або несумісність групи крові в організмі. Сироватка Кумбса містить антитіла проти людських антитіл IgG. Суміш тривалий час нагрівається (інкубується). Якщо на еритроцитах є антитіла, вони збиваються і тест стає позитивним.

Непрямий тест Кумбса складається з двох частин. Метою є визначення антитіл, які вільні в крові і не зв'язуються з клітинами крові.
Цього разу рідка частина (сироватка) фільтрується з крові пацієнта. Спочатку до сироватки додають еритроцити. Якщо в сироватці крові є вільні антитіла, вони зв’язуються з еритроцитами. Цю реакцію не видно. Тільки на другому етапі, як у прямому тесті Кумбса, сироватка Кумбса з антитілами проти людських антитіл додається і прогрівається. Тут теж вирізка стискається, якщо результат позитивний.

Оцінка

Якщо антитіла поєднуються з відповідною сироваткою Коома, антитіла в сироватці крові (рідка частина крові) зв'язуються з антитілами пацієнта. Антитіла мають Y-подібну форму, це означає, що вони завжди можуть зв'язувати двох зв'язуючих партнерів і, таким чином, зшивати еритроцити один з одним. Створюється велике скупчення клітин крові. Ці скупчення стають видимими - кров аглютинируется (згущується) і тест є позитивним.
Якщо у пацієнта немає відповідних антитіл, сироватка залишається рідкою. Ви не бачите жодних змін - тест негативний.

Які альтернативи?

Альтернативою тесту Кумбса є імунологічний метод ІФА (імуноферментний аналіз, пов'язаний з ферментами), в якому певні антитіла маркуються ферментом. Це антитіло додають до досліджуваного розчину. Якщо мічені антитіла реагують на антитіла в досліджуваному розчині, пов'язаний фермент активується і виробляє барвник. Відповідні пробірки змінюють колір - тест позитивний.

Окрім процедури ІФА, існує також ПІД ЗАПАДНИ, який часто використовується як підтверджуючий тест на позитивний ІФА.